Produkter

Differentiering af orbitale fibroblaster til modne adipocytter og efterfølgende akkumulering af fedtvæv er blevet vist i progressionen af ​​Graves' orbitopati (GO).Autofagi er involveret i adipogenese, men lidt er kendt om autofagis rolle i initieringen og progressionen af ​​GO.Formålet med denne undersøgelse er at undersøge rollen af ​​autofagi i patogenesen af ​​GO. Orbitale fedt-/bindevævseksplantater fra patienter med GO og fra normale forsøgspersoner, samt isolerede orbitale fibroblaster, blev analyseret.Adipogenese blev induceret ved hjælp af differentierende medium med eller uden hydrogenperoxid, og autofagi blev manipuleret ved hjælp af bafilomycin A1 og Atg5-målrettet kort hårnåle RNA (shRNA).Autophagosomer blev identificeret ved elektronmikroskopi.Ekspression af autofagi-relaterede gener og adipogenese-relaterede transkriptionsfaktorer blev analyseret ved real-time revers transkription-polymerase-kædereaktion og/eller Western blot-analyse.Lipiddråbeakkumulering blev undersøgt ved Oil Red O-farvning. Autofagiske vakuoler var mere rigelige i GO-celler end i ikke-GO-celler (p<0,05).Ekspression af autofagi-relaterede gener var signifikant højere i henholdsvis GO-væv og -celler end i deres ikke-GO-modstykker.Interleukin-1β øgede LC3-II-, p62- og Atg7-protein i GO-celler.Autophagosomakkumulering blev vist på dag 4 af adipogenese og faldt på dag 10 sammen med lipiddråbedannelse.Ekspression af LC3- og p62-proteiner steg inden for 48 timer efter differentiering og aftog gradvist fra dag 4 til 10. Bafilomycin A1-behandling og Atg5-knockdown med shRNA hæmmede lipiddråbeakkumulering og undertrykte ekspression af adipogene markører. Autofagi var øget i GO-væv og celler sammenlignet med non-GO væv og celler, hvilket tyder på, at autofagi spiller en rolle i GO patogenese.Autofagi-manipulation kan være et terapeutisk mål for GO.