Produkter

Beta-D-2'-deoxy-2'-fluor-2'-C-methylcytidin (PSI-6130) er en potent specifik hæmmer af hepatitis C-virus (HCV) RNA-syntese i Huh-7-replikonceller.For at hæmme HCV NS5B RNA-polymerasen skal PSI-6130 phosphoryleres til 5'-triphosphatformen.Fosforyleringen af ​​PSI-6130 og inhiberingen af ​​HCV NS5B blev undersøgt.Fosforyleringen af ​​PSI-6130 med rekombinant human 2'-deoxycytidin kinase (dCK) og uridin-cytidin kinase 1 (UCK-1) blev målt ved at anvende en koblet spektrofotometrisk reaktion.PSI-6130 blev vist at være et substrat for oprenset dCK med en Km på 81 mikroM og en kcat på 0,007 s-1, men var ikke et substrat for UCK-1.PSI-6130 monophosphat (PSI-6130-MP) blev effektivt phosphoryleret til diphosphat og efterfølgende til triphosphat af henholdsvis rekombinant human UMP-CMP kinase og nukleosid diphosphat kinase.Inhiberingen af ​​vildtype og muterede (S282T) HCV NS5B RNA-polymeraser blev undersøgt.Steady-state inhiberingskonstanten (Ki) for PSI-61 30 triphosphat (PSI-6130-TP) med vildtype-enzymet var 4,3 mikroM.Lignende resultater blev opnået med 2'-C-methyladenosintriphosphat (Ki=1,5 mikroM) og 2'-C-methylcytidintriphosphat (Ki=1,6 mikroM).NS5B med S282T-mutationen, som vides at give resistens over for 2'-C-methyladenosin, blev hæmmet af PSI-6130-TP lige så effektivt som vildtypen.Inkorporering af PSI-6130-MP i RNA katalyseret af oprenset NS5B RNA-polymerase resulterede i kædeterminering.