Produkter

CTP:phosphocholin cytidylyltransferase α (CCTα) er et nukleart enzym, der katalyserer det hastighedsbegrænsende trin i CDP-cholin-vejen for phosphatidylcholin (PC) syntese.Lipidaktivering af CCTα resulterer i dets translokation til den nukleare kappe og udvidelse af et intranukleært membrannetværk kaldet det nukleoplasmatiske reticulum (NR) af en mekanisme, der involverer membrandeformation.Nukleare laminer er også nødvendige for stabilitet og spredning af NR, men om denne unikke struktur eller den nukleare lamina generelt er nødvendig for PC-syntese vides ikke.For at undersøge dette forhold blev den nukleare lamina udtømt af RNAi eller afbrudt ved ekspression af Hutchinson-Gilford progeria syndrom (HGPS) mutant lamin A (progerin), og virkningen på CCTα og cholin metabolisme blev analyseret.siRNA-medieret silencing af lamin A/C eller lamin B1 i CHO-celler for at mindske NR havde ingen effekt på PC-syntese, mens dobbelt knockdown ikke-specifikt hæmmede pathwayen.For at bekræfte hans mindre rolle i PC-syntese blev kun 10% af forbigående overudtrykt cholin/ethanolamin-phosphotransferase påvist i NR.I CHO-celler var CCTa nukleoplasmatisk og co-lokaliseret med GFP-progerin i nukleare folder og invaginationer;HGPS-fibroblaster udviste imidlertid en unormal fordeling af CCTa i cytoplasmaet og kernekappen, der var ledsaget af en 2-fold reduktion i PC-syntese.På trods af dens ændrede lokalisering viste cholin-mærkningseksperimenter, at CCT-aktivitet var upåvirket, og hæmning af PC-syntese blev sporet til reduceret aktivitet af en hemicholinium-følsom cholintransportør.Vi konkluderer, at CCTα og laminer specifikt samarbejder om at danne NR, men den overordnede struktur af den nukleare kappe har en minimal indvirkning på CCT-aktivitet og PC-syntese.