ONPG CAS:369-07-3 98,0% Min hvid til off - hvidt pulver
| Katalognummer | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| produktnavn | ONPG(2-Nitrophenyl-beta-D-galactopyranosid) |
| Molekylær formel | C12H15NO8 |
| Molekylær vægt | 301,25 |
| Opbevaringsdetaljer | 2 til 8 °C |
| Harmoniseret tarifkode | 29400000 |
Produkt specifikation
| Renhed (HPLC) | Min.98,0 % |
| Udseende | Hvidt til råhvidt pulver |
| Løsning(1% i vand) | Klar, farveløs til svagt gul opløsning |
| Vandindhold(Karl Fisher) | Maks.0,5 % |
| Specifik optisk rotation [α]D20(c=1, H2O) | -65,0 °C til -73,0 °C |
Diskussion om ONPG test (β-galactosidase test)
Spørgsmål er ofte blevet rejst for nylig: 1. Hvorfor kan ONPG-testen bruges til at skelne mellem forsinket laktosefermentering?2. Hvorfor angiver den nationale standard, at det er nødvendigt at bruge 3% natriumchloridtrisaccharidjern (eller trisaccharidjern) til ONPG-testen?3. For Vibrio parahaemolyticus, hvorfor skal toluen tilsættes dråbevis i henhold til standarden, når der udføres OPNG-test?Hvad er funktionen?
Vores virksomhed har gennemgået en masse oplysninger, opsummeret dem og delt dem med dig nedenfor:
Princip: Det kinesiske navn på ONPG er o-nitrobenzen-β-D-galactopyranosid.ONPG kan hydrolyseres til galactose og gul o-nitrophenol (ONP) af β-galactosidase, så aktiviteten af β-galactosidase kan påvises ved farveændringen af dyrkningsmediet.
Laktose er et sukker, som de fleste mikroorganismer skal opdage.Dets stofskifte kræver to enzymer, den ene er cellepermease, laktose trænger ind i cellerne under påvirkning af permease;den anden er β-galactosidase, som hydrolyserer laktose til galactose.Laktose og glukose.β-Galactosidase kan også direkte virke på ONPG for at hydrolysere det til galactose og gul o-nitrophenol (ONP).Det kan gøres på 24 timer, selv med laktoseforsinkede fermentorer.Derfor forklarer den observationsresultaterne ved at plukke kultur 1 fra agarskråningen og inokulere den i en hel cirkel ved 36°C i 1-3 timer og 24 timer.Hvis der produceres β-galactosidase, bliver det gult i løbet af 1-3 timer, hvis der ikke er et sådant enzym, vil det ikke ændre farve på 24 timer.
I henhold til ovenstående to enzymer kan mikroorganismer opdeles i følgende kategorier:
1 laktose-fermenterende (18-24 timer) bakterier med permease og β-galactosidase P + G+;
2 Forsinkede lactosefermentorer (der tager længere end 24 timer), der mangler permease, men har galactosidase: P-G+.
3 ikke-lactosefermentorer, der mangler både permease og galactosidase: P-G-.
ONPG-testen kan bruges til at skelne laktose-lag-gærende bakterier (P-G+) fra ikke-fermenterende laktosebakterier (PG-), såsom:
1 Differentiere sene lactose-fermentorer (P-G+) fra ikke-lactose-fermentorer (P-G-).
(a) Citrobacter (+) og Salmonella arizonae (+) fra Salmonella (-).
(b) Escherichia coli (+) fra Shigella sonnei (-).
Hvorfor blev ONPG-assayet udført under anvendelse af en kultur natten over på 3 % natriumchloridferri-trisaccharid (jerntrisaccharid)?Vores virksomhed har konsulteret en masse information, men der er ingen klar udtalelse.Kun på FDA-webstedet står det skrevet, at "Inokuler kulturer, der skal testes, på tredobbelte sukkerjernagarskråninger og inkuber i 18 timer ved 37°C (eller anden passende temperatur, hvis det kræves). Næringsstof (eller andre) agarskråninger indeholdende 1,0 % laktose kan også anvendes."betyder: testbakterierne blev inokuleret på trisaccharidjernmediet og dyrket ved 37°C i 18 timer.Næringsagar-skrå (eller andet) medium indeholdende 1 % laktose er også acceptabelt.Derfor udledes det, at trisaccharidjernmediet indeholder lactose.Efter vækst natten over har bakterierne produceret en god aktiv β-galactosidase.Ved at bruge sådanne bakterier kan ONPG nedbrydes af β-galactosidase hurtigere.Det eksperimentelle fænomen er hurtigere og bedre manifesteret.Derudover er dråbevis tilsætning af toluen og et vandbad i 5 minutter alt sammen for at frigive β-galactosidase fuldstændigt.
