Produkter

Kulsyreanhydraseaktivatorer: den første aktiveringsundersøgelse af den humane sekretoriske isoform VI med aminosyrer og aminer.

Det sekretoriske isozym af human kulsyreanhydrase (hCA, EC 4.2.1.1), hCA VI, er blevet klonet, udtrykt og oprenset i et bakterielt ekspressionssystem.De kinetiske parametre for CO(2)-hydratiseringsreaktionen viste, at hCA VI havde ak(cat) på 3,4 x 10(5)s(-1) og k(cat)/K(M) på 4,9 x 10(7)M (-1)s(-1) (ved pH 7,5 og 20 grader C).hCA VI har en signifikant katalytisk aktivitet for den fysiologiske reaktion, af samme størrelsesorden som den allestedsnærværende isoform CA I eller det transmembrane, tumorassocierede isozym CA IX.En række aminosyrer og aminer blev vist at virke som CA VI-aktivatorer med varierende effektivitet.l-His, l-Trp og dopamin viste svage CA VI-aktiverende effekter (K(A)s i området 21-42 mikroM), hvorimod d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, serotonin og nogle pyridylalkylaminer var bedre aktivatorer med K(A)'er i området 13-19 mikroM.De bedste CA VI-aktivatorer var l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-amino-l-Phe og histamin, med K(A)'er i området 1,23-9,31 mikroM.Alle disse aktivatorer forstærker k(cat), som ikke har nogen effekt på K(M), og deltager således i det hastighedsbestemmende trin i den katalytiske cyklus, protonoverførselsreaktionerne mellem enzymets aktive sted og miljøet.