Produkter

1. Vi undersøgte de hæmmende virkninger af isorhamnetin på svampetyrosinase ved hæmningskinetik og beregningssimulering.Isorhamnetin inhiberede reversibelt tyrosinase på en blandet måde ved Ki=0,235±0,013 mM.Målinger af iboende og 1-anilinonaphthalen-8-sulfonat(ANS)-bindende fluorescens viste, at isorhamnetin ikke inducerede signifikante ændringer i den tertiære struktur af tyrosinase.For at få indsigt i inaktiveringsprocessen blev kinetikken beregnet via tidsintervalmålinger og kontinuerlige substratreaktioner.Resultaterne viste, at inaktivering induceret af isorhamnetin var en første-ordens reaktion med bifasiske processer.For at få yderligere indsigt simulerede vi docking mellem tyrosinase og isorhamnetin.Simulering var vellykket (bindingsenergier for Dock6.3: -32.58 kcal/mol, for AutoDock4.2: -5.66 kcal/mol og for Fred2.2: -48.86 kcal/mol), hvilket tyder på, at isorhamnetin interagerer med flere rester, f.eks. som HIS244 og MET280.Denne strategi med at forudsige tyrosinase-interaktion i kombination med kinetik baseret på en flavanonforbindelse kan vise sig nyttig til screening for potentielle naturlige tyrosinase-hæmmere.

2. Syreudfoldelsesvej for konalbumin (CA), et monomert glycoprotein fra hønseæggehvide, er blevet undersøgt ved hjælp af fjern- og nær-UV CD-spektroskopi, intrinsisk fluorescensemission, ekstrinsisk fluorescensprobe 1-anilino-8-naftalensulfonat (ANS) og dynamisk lysspredning (DLS).Vi observerer pH-afhængige ændringer i sekundær og tertiær struktur af CA.Den har en naturlig α-spiralformet sekundær struktur ved pH 4,0, men tabsstruktur ved pH 3,0.CA eksisterede udelukkende som en præ-smeltet kugletilstand og smeltet kugletilstand i opløsning ved henholdsvis pH 4,0 og pH 3,0.Effekten af ​​pH på konformationen og termostabiliteten af ​​CA peger mod dets varmebestandighed ved neutral pH.DLS-resultater viser, at MG-tilstand eksisterede som kompakt form i vandige opløsninger med hydrodynamiske radier på 4,7 nm.Slukning af tryptophanfluorescens med akrylamid bekræftede yderligere akkumuleringen af ​​en mellemtilstand, delvist udfoldet, mellem native og udfoldede tilstande.