Produkter

Indolamin 2,3-dioxygenase (IDO1) og tryptophan 2,3-dioxygenase (TDO) er to strukturelt forskellige enzymer, der har en forskellig vævsfordeling og fysiologiske roller, men begge katalyserer omdannelsen af ​​tryptophan til N-formylkynurenin (NFK).IDO1 er blevet klinisk valideret som et lille-molekyle lægemiddelmål for cancer, mens prækliniske undersøgelser indikerer, at TDO kan være et mål for cancerimmunterapi og neurodegenerativ sygdom.Vi har udviklet et high-throughput screeningsassay for IDO1 og TDO baseret på en ny kemisk probe, NFK Green, der reagerer specifikt med NFK for at danne et grønt fluorescerende molekyle med en excitationsbølgelængde på 400 nm og en emissionsbølgelængde på 510 nm.Vi giver den første side-by-side sammenligning af en række publicerede hæmmere af IDO1 og TDO og afslører, at den prækliniske IDO1 hæmmer forbindelse 5l viser signifikant krydsreaktivitet med TDO, mens den relative selektivitet af andre publicerede hæmmere blev bekræftet.Egnetheden til high-throughput screening af assays blev demonstreret ved at screene et bibliotek med 87.000 kemiske stoffer i 384- eller 1536-brønds format.Endelig demonstrerer vi, at assayet også kan bruges til at måle cellernes kapacitet til at metabolisere tryptofan og til at måle den cellulære styrke af IDO1- og TDO-hæmmere.