Produkter

Vi udviklede et nyt lille interfererende RNA (siRNA) leveringssystem ved hjælp af et ternært kompleks med polyethylenimin (PEI) og y-polyglutaminsyre (y-PGA), som viste lyddæmpende effekt og ingen cytotoksicitet.De binære komplekser af siRNA med PEI var ca. 73-102 nm i partikelstørrelse og 45-52 mV i ζ-potentiale.Silencing-effekten af ​​siRNA/PEI-komplekser steg med en stigning i PEI, og siRNA/PEI-komplekser med et ladningsforhold større end 16 viste signifikant luciferase-knockdown i en muse coloncarcinomcellelinje, der regelmæssigt udtrykker luciferase (Colon26/Luc-celler).Imidlertid blev der observeret stærk cytotoksicitet og blodagglutination i siRNA/Lipofectamin-komplekset og siRNA/PEI16-komplekset.Genopladning af kationiske komplekser med en anionisk forbindelse blev rapporteret at være en lovende metode til at overvinde disse toksiciteter.Vi fremstillede derfor ternære komplekser af siRNA med PEI (ladningsforhold 16) ved tilsætning af y-PGA for at reducere cytotoksicitet og levere siRNA.Som forventet faldt cytotoksiciteten af ​​de ternære komplekser med en stigning i γ-PGA-indholdet, hvilket reducerede kompleksernes ζ-potentiale.En stærk lyddæmpende effekt sammenlignelig med siRNA/lipofectaminkompleks blev opdaget i ternære komplekser inklusive y-PGA med en anionisk overfladeladning.Den høje inkorporering af ternære komplekser i Colon26/Luc-celler blev bekræftet med fluorescensmikrokopi.Efter at have opnået knockdown af et eksogent transficeret gen, blev kompleksets evne til at mediere knockdown af et endogent husholdningsgen, glyceraldehyd-3-phosphatdehydrogenase (GAPDH), vurderet i B16-F10-celler.Det ternære kompleks (siRNA/PEI16/y-PGA12 kompleks) udviste en signifikant GAPDH knockdown-effekt.Således udviklede vi et nyttigt siRNA-leveringssystem.