Produkter

Tet 5-methylcytosindioxygenaserne katalyserer DNA-demethylering ved at producere 5-hydroxymethylcytosin og yderligere oxiderede produkter.Tet1 og Tet2 er stærkt udtrykt i musepluripotente celler og nedreguleres i forskelligt omfang i somatiske celler, men de transkriptionelle mekanismer er uklare.Her definerede vi promotor- og enhancerdomænerne i Tet1 og Tet2.Inden for en 15-kb "superenhancer" af Tet1 er der to transkriptionsstartsteder (TSS'er) med forskellige aktiveringsmønstre under udvikling.En 6-kb promotorregion opstrøms for den distale TSS er meget aktiv i naive pluripotente celler, rapporterer autonomt Tet1-ekspression i et transgent system og gennemgår hurtigt DNA-methylering og silencing efter differentiering i dyrkede celler og native epiblast.En anden TSS nedstrøms, forbundet med en konstitutivt svag CpG-rig promotor, aktiveres af en naboforstærker i naive embryonale stamceller (ESC'er) og primede epiblastlignende celler (EpiLC'er).Tet2 har en CpG-ø-promoter med pluripotens-uafhængig aktivitet og en ESC-specifik distal intragen enhancer;sidstnævnte nedreguleres hurtigt i EpiLC'er.Vores undersøgelse afslører forskellige måder for transkriptionel regulering ved Tet1 og Tet2 under celletilstandsovergange af tidlig udvikling.Nye transgene reportere, der bruger Tet1 og Tet2 cis-regulatoriske domæner, kan tjene til at skelne nuancerede ændringer i pluripotente tilstande og de underliggende epigenetiske variationer.